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HEL(人紅白細胞白血病細胞)運輸

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  • 型號
  • 品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2017-08-11
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 所在地區(qū)上海市
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9990
  • 人氣值105306
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上海撫生實業(yè)有限公司

hanghai Fusheng Industrial Co., Ltd. 

成立于2012年,經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA研發(fā),代測,技術(shù)服務(wù)這一產(chǎn)品已使上海撫生成為中國公司。

公司產(chǎn)品涵蓋ELISA研發(fā)、細胞培養(yǎng),各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養(yǎng)基、自產(chǎn)實驗室耗材、小型儀器等。此外、上海撫生還代理了美國藥典標準品,中檢所標準品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產(chǎn)品。

上海撫生將進一步加強人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營,不斷提升企業(yè)的核心竟爭力,實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化的公司,服務(wù)于生命科學領(lǐng)域,迎接世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。

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HEL(人紅白細胞白血病細胞)運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
HEL(人紅白細胞白血病細胞)運輸 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品名稱:HEL(人紅白細胞白血病細胞)運輸
英文名稱:HEL red and white cells (leukemic cells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0835
HEL(人紅白細胞白血病細胞)運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
HEL(人紅白細胞白血病細胞)運輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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