原代人心臟纖維原細(xì)胞
人心臟纖維原分離自心臟組織；心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成，非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞。胞體呈梭形，胞質(zhì)較少，弱嗜酸性，胞核小，染色深。電鏡下可見(jiàn)，細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá)。當(dāng)組織受損時(shí)，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過(guò)程。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞，如在組織損傷后的修復(fù)過(guò)程中，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞。纖維細(xì)胞較小，呈多角形，胞質(zhì)較少，弱嗜酸性，胞核亦較小，染色較深，電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少，高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá)。成纖維細(xì)胞較大，呈星形或梭形，有突起，細(xì)胞核呈卵圓形，染色質(zhì)稀疏，染色淡，核仁明顯，胞質(zhì)較多。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖，形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對(duì)心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成，當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長(zhǎng)因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中最常見(jiàn)的細(xì)胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞，其功能活動(dòng)也得以恢復(fù)，參與組織損傷后的修復(fù)。因此，對(duì)心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。 |
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
英文名稱 | Human Cardiac Fibroblast Cells | 組織來(lái)源 | 心臟組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 貨號(hào) | GOY-01X1273 |
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀 變成 絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時(shí)培養(yǎng)，可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時(shí)間不能超過(guò)24h。
2. 從消化道、周?chē)袎乃澜M織等污染因素存在的區(qū)域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁，可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1～2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染，一旦發(fā)現(xiàn)，要及時(shí)清除。
人胚肺成纖維細(xì)胞；WI-38[WI38] | 非洲綠猴腎細(xì)胞；GL-37 |
人肝癌細(xì)胞；HHCC | 綿羊痘病毒(SPPV)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
人胎兒細(xì)胞株；HFT-8810[HFT8810] | 停乳鏈球菌(StD)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
人肝癌細(xì)胞；HB611 | 偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
小鼠白血病細(xì)胞；P388 | 乙型肝炎病毒cccDNA 染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（人膀胱癌細(xì)胞污染）；ECV-304[ECV304；ECV304] | 莫氏立克次體PCR試劑盒 |
牛腎細(xì)胞；MDBK(NBL-1) | 牛流行熱病毒(BEFV)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞 | 禽副粘病毒4型探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 |
牛陀螺狀細(xì)胞；BT | 麥類殼多胞斑點(diǎn)病菌PCR試劑盒 |
恒河猴腎細(xì)胞；LLC-MK2 | 柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞；RD | 雞源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 |
貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞；PG-4(S+L-) | 山羊痘病毒(GTPV)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞；CHL | 原代人心臟纖維原細(xì)胞流感病毒H6亞型(AIV-H6)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞；R1610[R1610] | 豬源性成分PCR試劑盒 |
登革病毒Ⅲ型檢測(cè)試劑盒 | 獼猴源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 |
