13585886131
當前位置：上海邦景實業有限公司>>技術文章>>PCR反應中的引物二聚體應對方法
PCR（聚合酶鏈式反應）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。如果反應出現了引物二聚體，有許多方法可以減少或消除反應中的引物二聚體。
1、 首先是優化熱循環條件，這主要是提高退火溫度。大多數情況下，兩步循環 (由 95°C 變性步驟直接進入60°C 退火和延伸步驟) 有利于強效擴增，因此引物設計時設定的成功退火溫度為 60°C。
2、可降低引物濃度，甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的幫助。大多數情況下，每條引物的理想最終濃度為 200 nM，但如有需要，可將濃度降至 60 nM。
3、鎂的最佳濃度一般約為 3 mM。高于此濃度易形成引物二聚體。
4、如果未對引物形成二聚體的傾向進行評估，則應補充評估并考慮重新設計 (如有需要)。通常情況下，最好使用熱啟動 DNA 聚合酶，并在冰上進行反應。
5、在理論上，針對同一靶點應同時檢測多個引物組。這實際上可以節省大量時間，因為如果這些引物中的一個能立即發揮作用，則可以減少花費在優化過。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
