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Flag抗體試驗問題集錦

閱讀:738發(fā)布時間:2013-9-22

Flag標簽系統(tǒng)是已被*的用于表達、純化以及檢測融合蛋白的表達系統(tǒng),廣泛應用于Western blotting、免疫細胞組化、免疫共沉淀、流式細胞術(shù)、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個研究領(lǐng)域。Flag標簽是一個與重組蛋白相融合的由 8個親水氨基酸(DYKDDDDK)組成的多肽片斷。Flag標簽只有8個氨基酸組成,因此它不會占據(jù)其他表位與結(jié)合域,避免導致融合蛋白的功能、分泌性以及轉(zhuǎn)運發(fā)生改變。由于它的親水性特點,F(xiàn)lag標簽傾向于定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結(jié)合以及被腸激酶酶解。

如何選擇合適的Flag標簽抗體?

我們在選擇Flag抗體時,主要根據(jù)自己的需要,特別是實驗應用上的需要。另外,一個抗體檢測后的應用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大;而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl Flag抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,終使用液相當于500ml),要比效價低的1ml的Flag抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,終使用液相當于2ml)性價比更高。

 

Abbkine的Flag標簽抗體的效價有點超出意料。做WB實驗時,*次按照說明書推薦的1:1000,顯示的條帶很強,后來不斷的稀釋摸索條件,1:10000稀釋的時候做WB條帶仍然是很不錯的。 ——中山大學醫(yī)學部一客戶

 

 
產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

 

 

為什么推薦Abbkine品牌的Flag抗體?

Flag系統(tǒng)是Sigma-Aldrich®擁有的系統(tǒng),因此Sigma的Flag標簽抗體是之前諸多客戶的選擇。Sigma的Flag標簽抗體主要有M1和M2兩種克隆號的抗體,其中M1克隆號的Flag抗體可用于檢測Flag標簽位于N末端的重組蛋白,而M2克隆號的Flag單克隆抗體則可以檢測幾乎所有的Flag標簽蛋白。其2010年的中國報價分別為¥4649/200μg和¥3683/200μg。

假如您想選擇一款性價比更高的Flag標簽抗體,那Abbkine可能是另一個優(yōu)先選擇,其價格比Sigma要低30%左右。Abbkine的Flag標簽抗體 Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#A02010)可以用于檢測和Flag標簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測Flag融合表達蛋白(包括N末端、C末端)等。該Flag抗體為小鼠源單克隆抗體,其免疫原為KLH偶聯(lián)的Flag標簽(DYKDDDDK)多肽。另外,Abbkine還同時提供經(jīng)HRP偶聯(lián)的Flag標簽抗體,尤其適合IP-WB驗證時去除二抗的干擾;兔源多克隆Flag抗體也為客戶提供另一種Flag標簽的檢測方案。

 

 
產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

 

 

Abbkine的Flag單克隆標簽抗體不僅能應用于細胞內(nèi)定位的IF實驗,同樣還能應用于IP實驗。1:200甚至更高的IP實驗稀釋比率,也說明了該抗體本身的具有很高的效價,同時,因為是單克隆抗體,因此特異性也很高。價所對應的高稀釋比率也意味著高性價比。對于WB實驗,其說明書的推薦起始稀釋比例是1:1000,但在在1:5,000的稀釋比率下也表現(xiàn)優(yōu)異(Abbkine也進行了10,000次以后的稀釋,仍然顯示出很好的條帶顯示,沒有在說明書里列出)。下圖為Abbkine的Flag抗體的應用圖示。

 

幻燈顯示

點擊圖片查看Flag標簽抗體更詳細信息

 

 

一個價的抗體不僅影響實驗結(jié)果的靈敏度,還意味著更高的性價比。Abbkine的Flag標簽抗體(貨號#A02010)在常規(guī)的WB實驗里, 推薦的起始稀釋比率為1:1000,實際在Abbkine的應用中,還有1:10,000甚至更高的稀釋比率,需要根據(jù)客戶具體的實驗條件進行進行優(yōu)化。

Abbkine還提供大包裝1ml的Flag標簽抗體,非常適合經(jīng)常進行His標簽系統(tǒng)免疫學檢測的實驗需求。為方便客戶的使用, 上述產(chǎn)品,Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場,提供化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰尽?/p>

 

產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

 

 

美國Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學和細胞學科研產(chǎn)品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國區(qū)域代理,將為客戶提供的常規(guī)免疫學試劑,如各種標簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時我們作為多家品牌的的中國代理或 區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,請致電* 轉(zhuǎn)801/802/803  或者/4876 到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實驗解決方案


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