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上海勁馬何經理分享elisa試劑盒空白值過高的問題

時間:2013/9/23閱讀:1957
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公司何為解決老師在實驗中碰到的elisa試劑盒空白值過高的問題,特意親臨實驗室給我們講解,何說:“ELISA實驗的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。但是,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果實驗過程中做得不仔細,也有可能毀了整個實驗。下面是在實驗中會影響到elisa試劑盒空白值過高的因素。”
①洗滌
洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,而您懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數。
②封閉
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。如果您的背景過高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長封閉時間。
③抗體濃度
我們通常會按照老師要求的操作步驟做,但是如果試劑稍有不同,則可能需要優化抗體的量。記住,非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。
④檢測試劑
另一點也很顯而易見:切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高背景。也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應加入終止液。
為了讓您的實驗得到滿意的效果,上海勁馬公司專業提供elisa試劑盒,試劑盒種屬有:人elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,小鼠elisa試劑盒,雞elisa試劑盒等等,質量保證,品質上乘,歡迎前來選購。

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