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免疫組化一抗選擇要點(diǎn)和技巧

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 免疫組化一抗選擇要點(diǎn)和技巧

要點(diǎn):一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的東西的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。  

一抗盡量選擇單克隆抗體,還要注意其抗體來源(兔抗、鼠抗或者其他)要與二抗匹配。至于進(jìn)口還是國產(chǎn)我覺得要看是什么組織,當(dāng)然大多數(shù)情況下還是進(jìn)口的好一點(diǎn),也可以咨詢本公司業(yè)務(wù)員:電  話:/60520498

傳  真:86-21-64881400

聯(lián)   人:何

手  機(jī):,,

抗體選擇首先考慮你需要染得的組織或細(xì)胞的來源,其次考慮在染色中需要不需要抗體雙標(biāo),明確了這一點(diǎn)后,就可以考慮你所需要的抗體的來源。在購買抗體的時(shí)候,如果你需要標(biāo)記的蛋白是比較穩(wěn)定、表達(dá)量比較高或者說是已經(jīng)非常常用的蛋白,那么可以考慮國產(chǎn)的抗體,如中杉或者博士德。如果是比較新的蛋白,或者是不太清楚的蛋白表達(dá)量的,建議你用進(jìn)口的抗體,如abcamcell signalsata等,進(jìn)口的抗體中sata的抗體比較便宜,但是用過后老是覺得抗體效價(jià)一般。

相關(guān)抗體反應(yīng)規(guī)律:

(1)初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時(shí),需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體,且抗體產(chǎn)生的量也不多,在體內(nèi)維持的時(shí)間也較短。   

(2)再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后,開始時(shí),由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合,可使原有抗體量略為降低。隨后,抗體效價(jià)迅速大量增加,可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍,在體內(nèi)留存的時(shí)間亦較長。   

(3)回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體:由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體,經(jīng)過一定時(shí)間后可逐漸消失。此時(shí)若再次接觸抗原,可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同,則稱為特異性回憶反應(yīng);若與初次反應(yīng)不同,則稱為非特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時(shí)性的,短時(shí)間內(nèi)即很快下降。

多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟

1、制備抗原。  

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。  

4、試取血進(jìn)行測試,看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。

6、純化出抗體。  

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。

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