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上海金穗生物科技有限公司
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膠體金探針的質(zhì)量鑒定

時(shí)間:2013-1-6閱讀:195
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1。金顆粒的大小及均勻度
用有Formvar支持膜的鎳網(wǎng)蘸取金標(biāo)記試劑,空氣干燥后,透射電鏡下觀察金顆粒的大小及均勻度,計(jì)算平均直徑,如電鏡放大倍數(shù)10萬(wàn),照片放大為2.5倍,100000×2.5=250000=25nm。空氣中干燥后乙酸鈾負(fù)染,在透射電鏡下觀察,可見金顆粒周圍有一明顯的空暈,表示顆粒表面吸附著蛋白質(zhì)分子。

支持膜(火棉膠膜)的制備;50mil5%的火棉膠+50mi乙酸戊酯,戊酯火棉膠。

2。用免疫細(xì)胞化學(xué)濾紙模型鑒定免疫金制劑的特異性和敏感性制得2.5%的乙酸
在WhatmamI號(hào)濾紙條上滴加2//l的抗原溶液(含抗原量分別為1ug、l00ng、10ng、3ng和lng),干燥后,紙條在甲醛蒸氣中固定。加適當(dāng)稀釋的抗體作用1h,用TBS(0.05mol/LpH7.4Tris緩沖液,含.15mol/LNaCl),1%Triton X-l00洗3次,每次10rain。隨后,紙條再用洗脫SephacrylS-400柱的相同洗脫緩沖液洗lOmin,再滴加不同稀釋度的金標(biāo)探針孵育1h。紙條再用TBS-Triton緩沖液洗3次,每次10rain。用TBS(不含TritonX—100)洗10min。再用雙蒸水洗3次各5min。用銀顯影液顯影30—40min。用雙蒸水洗終止顯影。
 

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