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上海金穗生物科技有限公司
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鞣酸—檸檬酸鈉還原法制備膠體金分散顆粒

時間:2013-2-27閱讀:540
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A液(80ml):1%氯化金,lml;雙重蒸餾水,79ml。
B液(20m1):1%檸檬酸鈉,4ml;1%單寧酸,0.lml;雙重蒸餾水,15.8ml。25mmol/L K2C03,0.1ml;
將上述A液加熱到60℃,然后將B液快速加入到A液中,繼續(xù)攪拌,在極短的時間內(nèi)加熱到煮沸(大約10min),此時顏色由黑一藍一亮紅(近似紅葡萄酒顏色)變化。pH調(diào)到所需要求(根據(jù)所標(biāo)記蛋白質(zhì)種類的不同,所需的pH也不一樣)。上述用量合成的膠體金為10nm,根據(jù)所加入鞣酸(或稱單寧酸)量的不同,可合成3—17nm顆粒大小的膠體金,見表。

鞣酸-檸檬酸鈉還原法制備方案
┌─────────┬──────────────────────────────┬───────────┐
│ │ B液 │ A液 │
│ 顆粒直徑/llm │ │ │
│ ├──────────────────────────────┼───────────┤
│ │1%檸檬酸鈉/ml 0.1mol/L K2C03/ml l%鞣酸/ml H20/ml │l%氯化金/ml HzO/ml │
├─────────┼──────────────────────────────┼───────────┤
│ 5 │ 4 0.2 0.7 15.1 │ 1 79 │
│ 10 │ 4 0.025 O.1 15.875 │ l 79 │
│ 15 │ 4 O.0025 0.02 15.9875 │ 1 79 │
└─────────┴──────────────────────────────┴───────────┘

A、B兩液混合后顏色改變的時間,在制備過程中基本以此表變化來決定加溫見表
A、B兩液混合后顏色改變所需的時間
┌───────┬────────┬───────┬───────┬────────┬────────┐
│ 顆粒直徑/nm │ 變藍時間/s │變紅時間/min │ 顆粒直徑/nm │ 變藍時間/s │ 變紅時間/min │
├───────┼────────┼───────┼───────┼────────┼────────┤
│ 5 │ 2 │ 3 │ 15 │ 300 │ 45 │
│ 10 │ 10 │ 10 │ │ │ │
└───────┴────────┴───────┴───────┴────────┴────────┘
在鞣酸—檸檬酸鈉還原法中,檸檬酸鈉是主要的還原劑;而鞣酸則具有雙重作用,既起還原作用,也有保護作用,它控制著“晶核”的形成過程,故可改變鞣酸的用量來制備不同顆粒的膠體金。
 

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