當(dāng)前位置:山東潤揚(yáng)儀器有限公司>>技術(shù)文章>>如何選擇液相色譜儀的梯度洗脫與等度洗脫
有些色譜知識的都知道,液相色譜儀的梯度洗脫和氣相色譜儀中的程序升溫類似,給色譜分離帶來很大的方便,已成為液相色譜儀*的部分。
那么問題來了,什么是梯度洗脫?比等度洗脫有什么優(yōu)點(diǎn)呢?所謂梯度洗脫,就是有兩種或兩種以上不同極性的溶劑,在分離過程中按照一定程序連續(xù)地改變,以改變流動相的配比和極性。通常用的流動相為二元溶劑。在梯度運(yùn)行期間,強(qiáng)溶劑B(如反相HPLC中的甲醇)的濃度增大。一般以這種溶劑中強(qiáng)溶劑B的體積比(%B)表示。
一、現(xiàn)在有許多實(shí)驗(yàn)室在使用液相色譜儀的梯度洗脫技術(shù),這是因?yàn)樘荻认疵摽煽朔榷认疵撝械囊恍┤觞c(diǎn)問題:
1、減少手工比例配比流動相,從而避免由此引起的誤差;
2、 避免早流出峰分離度不好的缺點(diǎn);
3、避免晚流出峰峰變快峰高降低的缺點(diǎn);
4、 避免混合物容量因子范圍寬時分析時間長的缺點(diǎn);
5、 避免保留時間長的組分污染色譜柱的缺點(diǎn)。
二、梯度洗脫液相色譜儀適合于以下幾種分析情況:
1、 具有較寬容量因子范圍的樣品,即組分較為復(fù)雜的;
2 、大分子樣品,相對分子質(zhì)量大于1000的,尤其是生物樣品。
3 、一些含有高保留時間的組分會干擾樣品分析,如果在一次分析中不能把它洗脫出去,就會殘留污染色譜柱,并影響下一次的樣品分析。
4、 即使在使用等度時也可以使用梯度洗脫選擇流動相的比例。
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