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當(dāng)前位置:山東潤(rùn)揚(yáng)儀器有限公司>>技術(shù)文章>>液相色譜儀分離條件的選擇與優(yōu)化
對(duì)于實(shí)驗(yàn)室液相色譜儀大家都不陌生,我們?cè)谧龇治鰰r(shí)大部分采用國(guó)標(biāo)或行標(biāo)的測(cè)定方法,往往忽略了儀器在性能指標(biāo)、檢測(cè)限、重復(fù)性等方面的差異,所以存在用同樣方法和步驟檢測(cè)的結(jié)果有所不同,這點(diǎn)做過(guò)實(shí)驗(yàn)化學(xué)分析的或多或少都有感受,這就要求我們對(duì)液相色譜儀器分離條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)倪x擇和優(yōu)化,已達(dá)到較為理想的實(shí)際分析結(jié)果。
一.減少柱內(nèi)展寬,提高柱效
1、流動(dòng)相:選用低粘度的流動(dòng)相,有利于增大液相色譜儀分析樣品組分在溶劑中的擴(kuò)散系數(shù)Dm,減少傳質(zhì)阻力。
2、固定相:①粒度小,均勻,以減小渦流擴(kuò)散和流動(dòng)相傳質(zhì)阻力;②改進(jìn)結(jié)構(gòu),盡可能采用大孔徑和淺孔道的表面多孔型載體或全多孔微粒型載體,減少滯留流動(dòng)相傳質(zhì)阻力。
3、流速:從H-U曲線(xiàn)可知,HPLC的較好流速在流速很小處,減少流速有利于提高柱效,但在實(shí)踐中為加快分析速度,常采用比較好流速高數(shù)倍的流速。
4、柱溫:適當(dāng)提高液相色譜儀柱溫,可降低流動(dòng)相粘度,減少傳質(zhì)阻力,但柱溫升高將使分辨率降低,柱壽命短,易產(chǎn)生氣泡,一般在室溫下進(jìn)行。
二. 柱外展寬
柱外譜帶展寬又稱(chēng)“柱外效應(yīng)”,系指從液相色譜儀進(jìn)樣點(diǎn)到檢測(cè)池之間除柱子本身以外的所有死體積所引起的色譜峰展寬,柱效下降。可分為:
1、柱前展寬 主要由進(jìn)樣引起,減小進(jìn)樣器的死體積,用閥門(mén)進(jìn)樣可減少柱前譜帶展寬,提高柱效。
2、柱后展寬 主要由接管、檢測(cè)器流通池體積及檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間等因素所引起。因此,盡可能用短而內(nèi)徑細(xì)的接管,減少流通池體積,改進(jìn)液相色譜儀檢測(cè)器和記錄系統(tǒng)的響應(yīng)速度等都是克服柱后展寬的途徑。
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