人轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒 

中文說明書 UNIONHONEST

　　　　　　　　　　　　本試劑僅供研究使用 標本：血清或血漿

試驗原理：
TGF-β1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知TGF-β1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將TGF-β1和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TGF-β1的濃度呈比例關(guān)系。


自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

人轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒 

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

人轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒 
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的TGF-β1標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的TGF-β1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-400pmol/L

4、敏感度： 1.0 pmol/L

人轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒 

DAP1018-1mlphospho-c-Kit （SCFR） （pTyr936） antibody 抗磷酸化原癌基因c-Kit抗體1ml
DAP1019-1mlphospho-c-Met （pTyr1365） antibody 抗磷酸化致癌基因C-Met抗體1ml
DAP1020-1mlphospho-c-Myc （pThr58/pSer62） antibody 抗磷酸化致癌基因C-Myc抗體1ml
DA1144-0.1mlAPP695/770（Amyloid protein precursor 695/770 ） 淀粉樣肽前體蛋白抗體0.1ml
DA1144-0.2mlAPP695/770（Amyloid protein precursor 695/770 ） 淀粉樣肽前體蛋白抗體0.2ml
DA1145-0.1mlAPP/Amyloid beta A4（A4 amyloid protein） APP淀粉樣肽前體蛋白抗體0.1ml
DA1145-0.2mlAPP/Amyloid beta A4（A4 amyloid protein） APP淀粉樣肽前體蛋白抗體0.2ml
DA1146-0.2mlphospho-APP（pTyr757） 磷酸化APP（Tyr757）淀粉樣肽前體蛋白抗體0.2ml
DA010-2mlhuman CD56 Monoclonal antibody/beads 抗人CD56 單抗免疫磁珠2ml
DA012-2mlrat CD4 Monoclonal antibody/beads 抗大鼠CD4 單抗免疫磁珠2ml
DA1147-0.2mlAPPL1（adaptor protein, phosphotyrosine interaction, PH domain and leucine zipper containing 1） 銜接因子蛋白含pH域磷酸*結(jié)合域和*拉鏈基元1抗體0.2ml
DAH1038-1mlGoat rat IgG Whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清1ml
DAH1038-10mlGoat rat IgG Whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清10ml
DAH1039-1mlGoat Guinea IgG Whole serum 羊抗豚鼠IgG抗血清1ml
DAH1039-10mlGoat Guinea IgG Whole serum 羊抗豚鼠IgG抗血清10ml
DAH1040-1mlGoat rabbit IgG Whole serum 羊抗兔IgG抗血清1ml
DA1148-0.1mlAQP1（aquaporin Protein 1）human, mo, rat, bovine, pig, dog, sheep, horse 水通道蛋白-1抗體0.1ml
DA1148-0.2mlAQP1（aquaporin Protein 1）human, mo, rat, bovine, pig, dog, sheep, horse 水通道蛋白-1抗體0.2ml
DA1149-0.1mlAQP2（aquaporin Protein-2） 水通道蛋白-2抗體0.1ml
DA1149-0.2mlAQP2（aquaporin Protein-2） 水通道蛋白-2抗體0.2ml
DA015-2mlrat CD25 Monoclonal antibody/beads 抗大鼠CD25單抗免疫磁珠2ml
DA016-2mlrat CD45 Monoclonal antibody/beads 抗大鼠CD45單抗免疫磁珠2ml
DA1150-0.1mlAQP3（aquaporin 3） 水通道蛋白-3抗體0.1ml