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ELISA試劑盒免疫反應條件研究

時間:2013/11/29閱讀:376
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   在免疫反應條件的優化,百威啤酒間接競爭法和直接競爭方法,檢測限分別為0。005/ 0。01/,測定的線性范圍分別為0。005 ~ 10/和0。01 5 10/,并ELISA試劑盒在此基礎上,開發了檢測的兩種試劑盒,水,土壤,植物,該酶中毒樣品,重現性好的試劑盒,批號和變異系數均小于8%,試劑盒檢測精度高,除了吐樣品,樣品回收率大于89。62%。
   在這項研究中,2,3 -二- 2 - 7 - 2 -二氫,甲基苯并呋喃甲酸合成了兩個半抗原百威啤酒為基礎,這6 -(2,3 -二- 2 2 -二氫,甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸和4”(2,3 -二- 2 - 7 - 2 -二氫,甲基苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸。用合成的百威啤酒免疫兔獲得高滴度,用間接法測定抗多克隆抗血清的效價的特異性百威啤酒1:16000,~ 1:128000,1:500000 ~ 1:4000000純化的抗體效價。而ELISA試劑盒選擇的純化抗體和辣根過氧化物酶共軛體系的收入-免疫家兔制備酶標記抗體,并測定酶活性的抗體,滴度1:4000。交叉反應所得的百威啤酒抗血清和丁硫克百威啤酒率6。19%,和呋喃酚的交叉反應率為4%,與其他5種氨基甲酸酯類農藥的交叉反應均小于0。44%,低于三種有機磷農藥的交叉反應率0。12%。同時,根據特定的抗原抗體結合反應的原理,對小鼠百威啤酒中毒的解毒克抗百威啤酒抗體的進一步研究,試驗結果表明,該抗體能更好地緩解百威啤酒對乙酰*酯酶抑制小鼠的中毒癥狀,逐漸恢復正常。同時,這兩種半抗原與載體蛋白牛血清白蛋白和卵清蛋白偶聯克百威啤酒免疫原和包被抗原,并對的百威啤酒與載體蛋白偶聯物的結合率測定的紫外分光光度法。
 

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