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豚鼠ELISA試劑盒本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。間接法的優點是只要變換包
被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
間接法成功的關鍵在于抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結
果，但應盡可能予以純化，以提高試驗的特異性。特別應注意除去能與一般健康人血清發
生反應的雜質，例如以E.Coli為工程酶的重組抗原，如其中含有E.Coli成份，很可能與受過
E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發生反應。抗原中也不能含有與酶標抗人Ig反應的物
質，例如來自人血漿或人體組織的抗原，如不將其中的Ig去除，試驗中也發生假陽性反
應。另外如抗原中含有無關蛋白，也會因竟爭吸附而影響包被效果。
間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的
特異性IgG只占總IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強，非特異IgG可直接吸附到固相載體
上，有時也可吸附到包被抗原的表面。因此在間接法中，抗原包被后一般用無關蛋白質
（例如牛血清蛋白）再包被一次，以封閉（blocking）固相上的空余間隙。另外，在檢
測過程中標本須先行稀釋（1:40~1:200），以避免過高的陰性本底影響豚鼠ELISA試劑盒結果的判斷。
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