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上海滬鼎告訴您檢測(cè)沙門(mén)氏菌用什么培養(yǎng)基?

時(shí)間:2014/6/3閱讀:1832
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現(xiàn)在國(guó)標(biāo)中規(guī)定使用的培養(yǎng)基主要有四種,其菌落特征分別如下:BS 瓊脂菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色,菌落周?chē)囵B(yǎng)基可呈黑色或棕色; 有些 菌株形成灰綠色的菌落,周?chē)囵B(yǎng)基不變。 HE 瓊脂藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或 幾乎全黑色。 XLD 瓊脂菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心。沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基 按照顯色培養(yǎng)基的說(shuō)明進(jìn)行判定。 要是條件允許的話(huà)推薦使用沙門(mén)顯色培養(yǎng)基,沙門(mén)氏菌在這種培養(yǎng)基上的菌落特征非常明顯,一般為紫紅色。容易分辨且不易漏檢。

沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基原理:

蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;膽鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌;選擇性添加劑增強(qiáng)培養(yǎng)基的抑制雜菌的能力;混合色素分別與沙門(mén)氏菌和大腸菌群所對(duì)應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán),在淡黃色平板上沙門(mén)氏菌產(chǎn)生品紅色的菌落,大腸菌群產(chǎn)生藍(lán)綠色的菌落。 

沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法:

1、稱(chēng)取本品47.5g,混合均勻加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌直至*溶解(不能持續(xù)高溫加熱,建議不要重復(fù)煮溶),不需高壓滅菌,冷至50℃,加入10支沙門(mén)氏菌選擇性添加劑(凍干粉每支需先用1ml無(wú)菌水溶解),混勻,傾注滅菌平皿。

2、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液與增菌液。

3、建議使用二步增菌法:

(1)前增菌:將處理過(guò)的樣品25g置于225mL緩沖蛋白胨水中,混合均勻后37℃培養(yǎng)6~8h;

(2)選擇性增菌:取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)中,混合均勻后37℃培養(yǎng)18~24h;

4、用接種環(huán)取增菌液一環(huán),劃線(xiàn)接種于沙門(mén)氏菌顯色平板上,置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。

5、觀察結(jié)果。挑取顯色平板上呈品紅色,扁平透明,邊緣光滑,直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。

6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn),對(duì)疑似沙門(mén)氏菌菌落進(jìn)行生化鑒定。

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