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上海滬鼎ELISA試劑盒雙抗夾心法

時間:2014/10/23閱讀:1141
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上海滬鼎生物代理銷售ELISA試劑盒,現貨供應,提供技術指導和售后服務,免費代測。歡迎。

雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:

  1) 將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。

  2) 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。  洗滌除去其他未結合物質。

  3) 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合  的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。

  4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量?! ≡谂R床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步檢測。

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