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小鼠白介素6酶聯免疫分析

時間:2014/12/16閱讀:1079
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小鼠白介素6(IL-6)酶聯免疫分析

 

檢測范圍:                                                          

0-8 ng/L

使用目的:

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中白介素6(IL-6)含量

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的小鼠白介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6)再與HRP標記的白介素6(IL-6)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白介素6(IL-6)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標試劑

6ml×1

8

標準品(16ng/L

0.5ml×1

3

酶標包被板

12孔×8

9

標準品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

8 ng/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

4 ng/L

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

2 ng/L

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

1 ng/L

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

0.5 ng/L

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl

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