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小鼠尿白蛋白檢測(cè)試劑盒范圍可用于測(cè)定抗原及抗體。

時(shí)間:2015/4/8閱讀:1211
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小鼠尿白蛋白檢測(cè)試劑盒范圍可用于測(cè)定抗原及抗體。
這種測(cè)試方法需要三個(gè)必要試劑:
一、固相的抗原或抗體,即“免疫吸附劑";
二、酶標(biāo)記的抗原或抗體,即“酶聯(lián)物";
三、酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可以設(shè)計(jì)不同的檢測(cè)方法。雙抗體夾心法的反應(yīng)模式。用特異性抗原進(jìn)行包被盒制備酶結(jié)合物,以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗體。此法受檢標(biāo)準(zhǔn)品不需稀釋,可以直接用于測(cè)定,因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常用本方法。間接法是檢測(cè)抗體原理是利用酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白)以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體。
1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2)加稀釋的受檢血清,保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,血清中的其他成分在洗滌過程中被洗去。
3)加酶標(biāo)抗抗體。可用酶標(biāo)抗人IG以檢測(cè)總抗體,但一般多用酶標(biāo)抗人IGG檢測(cè)IGG抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體結(jié)合,從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量成正相關(guān)。
4)加底物顯色。間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。雖然有時(shí)用粗提抗原包被也能取得實(shí)際有效的結(jié)果,但應(yīng)盡可能予以純化,以提高試驗(yàn)的特異性。特別注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì)。間接法中,抗原包被后一般用無關(guān)蛋白質(zhì)(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封閉固相上的空余間隙。另外,在檢測(cè)過程中標(biāo)本需先行稀釋(1:40~1:200),以避免過高的陰性本底影響結(jié)果的判斷。

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