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本周推薦—大鼠促黃體素ELISA試劑盒

時間:2015-8-10閱讀:998
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上海滬鼎供應各種種屬ELISA試劑盒、血清、抗體等科研產品,本周推薦產品為大鼠促黃體素(LH)ELISA試劑盒,本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中促黃體素(LH)含量

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠促黃體素(LH)水平。用純化的大鼠促黃體素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體素(LH)再與HRP標記的促黃體素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠促黃體素(LH)濃度。

操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
  2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  
  4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  7. 溫育:操作同3
  8. 洗滌:操作同5
  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
  11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

試劑盒6大特點:

1、、靈敏、特異的抗體;
2、穩定的重復性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
5、可檢測指標齊全:細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優生優育檢測等等;
6、*,質量保證,zui大限度的節省實驗經費。

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