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精品推薦:兔熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒

時間:2017-2-23閱讀:845
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    小白兔,白又白,兩只耳朵豎起來!萌萌的小白兔有萌化到你的心了嗎?今天上海滬鼎為大家推薦我司 BIM品牌:兔熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒。

       
    實(shí)驗(yàn)原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被兔熱休克蛋白27(HSP-27)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔熱休克蛋白27(HSP-27)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
    試劑盒組成:

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

8孔×12

8孔×6

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

 

在技術(shù)在上述方面表現(xiàn)出如下*性:
1、靈敏度高
雖然酶活性調(diào)節(jié)Elisa方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大Elisa中,檢測的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達(dá)不到這個水平(大于104個分子),但表明Elisa在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的。
2、特異性強(qiáng)
從免疫反應(yīng)的角度來說,Elisa與RIA的特異性應(yīng)該是一致的。但在Elisa方法中,由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應(yīng)有專一性,從而增加了該方法的特異性。
3、對儀器設(shè)備要求不高,測定成本低
Elisa測定在普通實(shí)驗(yàn)室便可進(jìn)行,常用的儀器設(shè)備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標(biāo)讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價格折算,酶標(biāo)儀的價格只及液閃儀的1/6至1/4,因此每測定一個樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法,還可在野外進(jìn)行,操作十分方便。
4、方法快速、簡便
均質(zhì)酶免疫測定方法操作時,所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進(jìn)行,不需任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數(shù)分鐘便能得出結(jié)果。
5、試劑保存時間較長
作為檢測指示劑用的酶和酶標(biāo)記物,在低溫或干燥條件下相對穩(wěn)定,可保存半年至數(shù)年之久。
6、自動化程度高
Elisa由于不存在放射性同位素污染,因此,除加待測樣本需要人工操作外,其他各步驟均可用儀器自動化完成。在這種自動化條件下,平均每人每天可完成2000余個樣本的檢測工作。
7、方法種類多
Elisa技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn),并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發(fā)展成為許多新方法。此外,發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因?yàn)椋?,用于Elisa技術(shù)的酶其種類遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣,有希望開發(fā)很多類型的酶用于Elisa,并建立相應(yīng)的Elisa方法。相反,自然界的化學(xué)元素是有限的,放射性同位素的種類更加有限。第二,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對應(yīng)的生色源或供氫體的種類也有遠(yuǎn)大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?br />8、無放射性同位素污染
Elisa技術(shù)應(yīng)用酶促反應(yīng)作為檢測免疫反應(yīng)強(qiáng)度的依據(jù),在終端測定中毋須接觸放射性同位素,根本不存在放射性污染問題(某些為提高檢測靈敏度而建立的酶免疫放射底物方法除外)。

    
 

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