ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技能之后發(fā)展起來的一種免疫酶技能。此項(xiàng)技能自70年代初面世以來，發(fā)展十分迅速，現(xiàn)在已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
     

    ELISA試劑盒ELISA原理——ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為根底，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技能。因?yàn)榭乖⒖贵w的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每參加一種試劑孵育后，可通過洗刷除去多余的游離反應(yīng)物，然后確保試驗(yàn)成果的特異性與安穩(wěn)性。在實(shí)踐運(yùn)用中，通過不同的規(guī)劃，詳細(xì)的辦法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法，用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
 

ELISA試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備作業(yè)
1. 請(qǐng)?zhí)嵩?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。
2. 將濃縮洗刷液用雙蒸水稀釋（1:25）。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗刷液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再洗刷液。（加熱溫度不要超越50℃）運(yùn)用時(shí)洗刷液應(yīng)為室溫。
3. 規(guī)范品: 參加規(guī)范品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干規(guī)范品中，靜置10分鐘，待其充沛溶解后，悄悄混勻（濃度為5000 pg/ml）。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋）。主張成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如2500pg/ml規(guī)范品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）5000pg/ml的上述規(guī)范品參加含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其他濃度以此類推。
4. 生物素化抗體作業(yè)液：試驗(yàn)前核算當(dāng)次試驗(yàn)所需用量（以100μl/孔計(jì)），實(shí)踐時(shí)應(yīng)多100-200μl。運(yùn)用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:100）成作業(yè)濃度。當(dāng)日運(yùn)用。
5. 酶結(jié)合物作業(yè)液：試驗(yàn)前核算當(dāng)次試驗(yàn)所需用量（以100μl/孔計(jì)），實(shí)踐時(shí)應(yīng)多 100-200μl。運(yùn)用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:100）成作業(yè)濃度。當(dāng)日運(yùn)用。
 

    ELISA試劑盒試劑特色——Elisa試驗(yàn)敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，ELISA試劑安穩(wěn)、易保存，操作簡(jiǎn)潔，成果判別較客觀等因素。