對外ELISA檢測技術(shù)服務(wù)
上海博研生物工程研究中心ELISA試劑盒對客戶的承諾：
1.有質(zhì)量問題免費包換，合同上注明了的.（質(zhì)量問題包括運輸不當(dāng)，客戶在使用過程中測不出結(jié)果，等等！）
2.全程技術(shù)指導(dǎo)。（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析，有任何疑問，我們技術(shù)都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務(wù)。（你只需把標本寄過來，我們?yōu)槟愎?jié)省時間，幫你出結(jié)果，原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)。
服務(wù)內(nèi)容：
凡購買本司目錄任何一種酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，您只需將需要檢測的動物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……）種類和檢測指標（介素類、因子類）及標本數(shù)量（48T/96T）告知我司業(yè)務(wù)人員即可。在接到客戶標本當(dāng)日起，兩周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中！
質(zhì)量保證：
我公司提供的檢測用所有試劑，適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本，靈敏度*，多年專業(yè)酶免服務(wù)，我們保證對所售任何產(chǎn)品一概負責(zé)到底，每一份實驗結(jié)果都真實可靠！
注意事項：
在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當(dāng)天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆堅炷Ｈ〔暮螅瑢吮炯皶r分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項請與我司技術(shù)人員溝通。
液體類標本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
*血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
*血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
*尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
*細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
*組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
ELISA方法簡介
1.包被抗原：稀釋液pH9.6碳酸鹽緩沖液，多肽濃度2ug/ml，0.1ml/孔，4ºC過夜，洗凈。
2.1%BSA（pH9.6碳酸鹽緩沖液）封閉，0.1ml/孔，37ºC1h，洗凈。
3.稀釋抗血清（可稀釋不同濃度）0.1ml/孔，37ºC30分鐘，洗凈。
4.稀釋辣根過氧化物每標記的二抗0.1ml/孔，37ºC40分鐘，洗凈。
5.顯色：TMB顯色
A液：四甲基聯(lián)苯胺10mg溶于DMF1ml中，再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍.
B液：5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml。
終止液：2N硫酸
A液、B液各一滴，比光顯色10分鐘，終止液一滴。
6.450nm波長測OD值
