斑馬魚睪酮（T）實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中斑馬魚睪酮（T）水平。用純化的斑馬魚睪酮（T）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入睪酮（T），再與HRP標記的睪酮（T）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的睪酮（T）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中斑馬魚睪酮（T）濃度。

標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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斑馬魚睪酮（T）計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。