采用進口抗體對國內包被，博研生物優勢供應“人胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA檢測試劑盒”，保證質量，有任何質量問題或客戶做不出實驗結果均可免費退換，咨詢：，添加客服:索取產品說明書。

產品名稱:人胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA檢測試劑盒

貨號：BYS104220B

我公司ELISA試劑盒服務標準：

1.有質量問題免費包換，合同上注明了的.（質量問題包括運輸不當，客戶在使用過程中測不出結果，等等！）
2.全程技術指導。（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結束后的數據分析，有任何疑問，我們技術都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務。（你只需把標本寄過來，我們為你節省時間，幫你出結果，原始數據，分析數據均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務。

人胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA檢測試劑盒ELISA（酶聯接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。

      實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。

技術問答：

提問：elisa檢測到目的蛋白但是wb怎么都做不出來答：這是很正常的，ELISA一般可以檢測到ng級的蛋白，而WB的檢測限是10微克級的。除非你用ELISA檢測到蛋白含量很大，達到了10微克級以上，這時wb做不出來就值得找找原因了。

ELISA試劑盒用戶：*是配好的嗎？

博研生物解答：*是配好的。

ELISA試劑盒用戶：我想ELISA試劑盒用戶一下，標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸？檢測出來的吸光度很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左右？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa試劑盒）

博研生物解答：是線性回歸。檢測出來的值比較低，樣本、稀釋、操作等，原因很多，但只要在可操作范圍就行。

試劑盒本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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操作步驟：
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。