采用進口抗體對國內包被，博研生物優勢供應“人過氧化物酶體膜蛋白3(PMP3)ELISA檢測試劑盒”，保證質量，有任何質量問題或客戶做不出實驗結果均可免費退換，咨詢：，添加客服:索取產品說明書。

產品名稱:人過氧化物酶體膜蛋白3(PMP3)ELISA檢測試劑盒

貨號：BYS104206B

我公司ELISA試劑盒服務標準：

1.有質量問題免費包換，合同上注明了的.（質量問題包括運輸不當，客戶在使用過程中測不出結果，等等！）
2.全程技術指導。（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結束后的數據分析，有任何疑問，我們技術都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務。（你只需把標本寄過來，我們為你節省時間，幫你出結果，原始數據，分析數據均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務。

人過氧化物酶體膜蛋白3(PMP3)ELISA檢測試劑盒ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。

方法一：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：
1.　包被：用0.05M PH9，碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml，在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml，37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

技術問答：

提問：elisa檢測到目的蛋白但是wb怎么都做不出來答：這是很正常的，ELISA一般可以檢測到ng級的蛋白，而WB的檢測限是10微克級的。除非你用ELISA檢測到蛋白含量很大，達到了10微克級以上，這時wb做不出來就值得找找原因了。

ELISA試劑盒用戶：*是配好的嗎？

博研生物解答：*是配好的。

ELISA試劑盒用戶：我想ELISA試劑盒用戶一下，標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸？檢測出來的吸光度很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左右？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa試劑盒）

博研生物解答：是線性回歸。檢測出來的值比較低，樣本、稀釋、操作等，原因很多，但只要在可操作范圍就行。

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試劑盒本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。