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產品名稱:人核糖核酸酶H(RNASEH)ELISA檢測試劑盒
貨號:BYS104195B
我公司ELISA試劑盒服務標準:
1.有質量問題免費包換,合同上注明了的.(質量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結果,等等!)
2.全程技術指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結束后的數據分析,有任何疑問,我們技術都會即時給你去電)
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人核糖核酸酶H(RNASEH)ELISA檢測試劑盒ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。
方法一:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml,在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
技術問答:
問:不同盒子里的孔下次能不能用?
答:一個盒子有96孔和48的 要是真的用不完或標本不多的情況下,做點處理后在存放。
問:做出來的結果:標準品的吸光度呈線性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預的大鼠血漿都基本沒有表達,這是什么原因?
答:樣本、稀釋、室控和機器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近,好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測滴度。
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問:收集血清的時候用什么管?
答:普通離心管即可。
問:96t可以檢測多少個樣本?48t可以檢測多少個樣本?
答:96t雙標準的可以檢測85個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。96t單標準可以檢測90個樣,7個標準品控 1個空白對照。48t雙標準的可以檢測37個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。48t單標準可以檢測40個樣本,其他有7個標準品孔,1個空白對照。
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