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人真胰島素(TI)ELISA試劑盒實驗步驟

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更新時間:2016-01-22 14:59:45瀏覽次數:124次

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上海博研生物優質提供“人真胰島素(TI)ELISA試劑盒實驗步驟",血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。保證實驗效果,試劑盒產品有任何質量問題,一經查實,免費調換。咨詢!

人真胰島素(TI)ELISA試劑盒實驗步驟產品詳細資料

產品編號 BYS10591B
英文名稱 Human true insulin,TI Elisa Kit 
操作步驟
用于檢測未知抗體的間接法:
1. 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
2. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
3. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
4. 人真胰島素(TI)ELISA試劑盒實驗步驟產結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“ "、“-"號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
樣品收集、處理及保存方法:
  1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅       速小心地分離。
  2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
  3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4、人真胰島素(TI)ELISA試劑盒實驗步驟產保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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