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技術文章

ELISA試劑盒辦法原理和操作留意

閱讀:194發布時間:2017-7-26

新的一年,上海晶抗技能專員為elisa試劑盒新手入門的運用技能陳述做出一番收拾,在這里共享給您,供參閱。
ELISA試劑盒辦法原理
一、雙抗體夾心法測定抗原
1.將抗原免疫種動物取得的抗體吸附于固相外表;
2.加抗原,形成抗原-抗體復合物; 
3.加抗原免疫第二種動物取得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物;
4.加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體); 
5.加底物。底物的降解量=抗原量。
二、直接法測定抗原 
1.將抗原吸附在載體外表;
2.加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物;
3.加底物。底物的降解量=抗原量。 
三、直接法測定抗體
1.將抗原吸附于固相載體外表;
2.加抗體, 形成抗原-抗體復合物;
3.加酶標抗體;
4加底物。 測定底物的降解量=抗體量。

 

ELISA試劑盒操作留意

1. 運用潔凈的塑料容器裝備洗刷液,運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
2.洗刷酶標板時應充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
3.底物A應蒸發,防止長期翻開蓋子。底物B對光靈敏,防止長期露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗完成后應立即讀取OD值。
4.試劑應按標簽闡明書貯存,運用前康復到室溫。稀稀往后的標準品應丟棄,不行保留。
5.試驗中不必的板條應立即放回包裝袋中,密封保留,防止蛻變。
6.不必的其它試劑應包裝好或蓋好。不相同批號的試劑不要混用。保質前運用。
7.運用一次性的吸頭防止穿插污染,汲取終止液和底物A、B液時,防止運用帶金屬有些的加樣器。
8.運用潔凈的塑料容器裝備洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9.洗刷酶標板時應充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
10.底物A應蒸發,防止長期翻開蓋子。底物B對光靈敏,防止長期露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗完成后應立即讀取OD值。
11.參加試劑的次序應共同,以確保所有反響板孔溫育的時刻相同。
12.依照闡明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。
 
以上由上海晶抗有限公司技能人員收拾,期望對做試驗的兄弟有所協助,還需要了解更多具體內容請檢查試劑盒闡明書或咱們

 


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