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越南芽孢桿菌保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-26 15:01:35瀏覽次數(shù):169次

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越南芽孢桿菌保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。

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規(guī)格參數(shù):
資源名稱  越南芽孢桿菌保存
種屬: Bacillus│vietnamensis

分離基物: 泥樣

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0223

生長條件: 30℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
BIGGY瓊脂*英文:BIGGY Agar  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于念珠菌的分離培養(yǎng)和計數(shù)  

1%吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基價格英文:1%Tween80-Corn Meat Agar Mediun  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于白色念珠菌產(chǎn)芽管試驗。  

SDAY培養(yǎng)基說明書英文:SDAY Medium  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于真菌的分離培養(yǎng)  

麥芽浸膏瓊脂供應(yīng)英文:Malt Extract Agar  產(chǎn)品規(guī)格:200g  產(chǎn)品用途:用于霉菌和酵母菌的分離培養(yǎng)和計數(shù)  

皮膚癬菌鑒別瓊脂(DTM)供應(yīng)英文:DTM Agar  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于皮膚癬菌鑒別培養(yǎng)  

馬鈴薯-蔗糖培養(yǎng)基價格英文:Potato sucrose Medium  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于霉菌增菌培養(yǎng)  

無機鹽瓊脂培養(yǎng)基供應(yīng)英文:Irganic Agar  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于紡織品防霉性能測試  

礦物鹽瓊脂說明書英文:Mineral Salts Agar  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于家用紡織品防霉性能測試  

酵母蛋白胨培養(yǎng)基供應(yīng)英文:Yeast Extract Peptone  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于真菌的培養(yǎng)  

麥芽汁瓊脂價格英文:Malt Extract Agar  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于霉菌和酵母菌計數(shù)  

YM培養(yǎng)基供應(yīng)英文:YM Medium  產(chǎn)品規(guī)格:250g  產(chǎn)品用途:用于霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)  

小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10elisa檢測試劑盒

英文名稱:Mouse CXCL10 ELISA KIT

反應(yīng)性:Mouse

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:30 pg/ml

檢測目標(biāo):CXCL10/IP10

應(yīng)用:Sandwich ELISA
無丙二酸檸檬酸桿菌 Citrobacteramalonaticus

拉氏西地西菌 Cedecealapagei

戴氏西地西菌 Cedeceadavisae

痰塔特姆氏菌 Tatumellaptyseos

溫和氣單胞菌 Aeromonassobria

拉氏普羅威登斯菌 Providenciarustigianii

舒氏氣單胞菌 Aeromonasschubertii

維氏氣單胞菌 Aeromonasveronii

科氏葡萄球菌科氏亞種 Staphylococcuscohniisubsp.cohnii

木糖葡萄球菌 Staphylococcusxylosus

溶脲支原體抗體1盒UU AntibodyBR

YT肉湯250克YT BrothBR

2×YT瓊250克2×YT Medium AgarBR

細(xì)菌篩選培養(yǎng)基100克Bacterium Screening MediumBR

500克

ER培養(yǎng)基10升Eriksson MediumBR

YT瓊250克YT AgarBR

2×YT肉湯250克2×YT Medium BrothBR

500克

香蕉粉100克Banana powderBR

ER培養(yǎng)基(含維生素)10升Eriksson Medium with vitaminsBR

MS培養(yǎng)基250克MS Medium用于植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
越南芽孢桿菌保存自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體Berberrubine中文名:小檗紅堿別名:分子式:C19H16Cl4

酰基輔酶A硫酯酶8Theophylline中文名:茶堿別名:分子式:C7H8N4O2

載脂蛋白A5抗體Brucine中文名:別名:分子式:C23H26N2O4

溶血磷脂酸酰基轉(zhuǎn)移酶D抗體Preskimmianine中文名:前茵芋堿別名:分子式:C17H214

載脂蛋白E3抗體10-Hydroxycamptothecin中文名:10-羥基喜樹堿別名:分子式:C20H16N2O5

 

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