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KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

參  考  價(jià):1 - 560 /盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2025-05-29 14:38:49瀏覽次數(shù):165次

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原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
保存條件 -20℃、避光 貨號 GOY-XP4703
產(chǎn)品規(guī)格 1*125ml/500ml 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基一般使用RPMI - 1640培養(yǎng)基,添加10% - 20%胎牛血清、1%雙抗,可能還需添加一些與食管癌細(xì)胞生長相關(guān)的因子,如轉(zhuǎn)化生長因子 - β(TGF - β)等,以支持KYSE - 140細(xì)胞(人食管癌細(xì)胞)的生長和增殖。

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基


產(chǎn)品名稱

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

貨號

GOY-XP4703

規(guī)格

1*125ml/500ml

用途

僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品介紹

由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持KYSE-140細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含KYSE-140細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KYSE-140細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基          445 mL

特級胎牛血清        50 mL

P/S青霉su-鏈霉su        5 mL

 

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法:按照對應(yīng)保存條件保存12個(gè)月,配置好的培養(yǎng)基2℃~8℃,保存2個(gè)月;

質(zhì)量控制

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

細(xì)胞復(fù)蘇?:

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞,迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?:

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細(xì)胞,以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片,重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?:

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí),進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液,轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清,加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?:

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,棄上清。

加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,標(biāo)記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

KYSE-140 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

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