選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
產(chǎn)品名稱：大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒
英文名稱：Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）；-20℃（長時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
6-溴-1-己烯 2695-47-8卡洛磺鈉τ-蛋白激酶1(τPK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

6-溴-1-己烯 2695-47-8奧美拉唑強(qiáng)啡肽(Dyn)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

6-溴-1-己烯 2695-47-8維生素B2甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

2-氨基-4,5-二甲氧基苯 26961-27-3泛酸鈣甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2-氨基-4,5-二甲氧基苯 26961-27-3烏苯美司甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

9,10-二(1-萘基)蒽 26979-27-1阿苯達(dá)唑上皮型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

9,10-二(1-萘基)蒽 26979-27-1苯磺酸氨氯地平凋亡相關(guān)因子配體(FASL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

D-erythro-sphingosine-1-phosphate 26993-30-6鹽酸特拉唑血紅素結(jié)合蛋白(HPX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%

5-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲 27006-76-4蛋白激酶N2(PKN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

5-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲 27006-76-4氨力農(nóng)蛋白激酶N2(PKN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

5-溴-2-苯基吡啶 27012-25-5更昔洛韋蛋白激酶N2(PKN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

3,5-二甲酸甲酯 2702-58-1腎上腺色腙CD3d分子(CD3d)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

3,5-二甲酸甲酯 2702-58-1紫杉Toll樣受體1(TLR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2-溴-5-甲氧苯(BMA) 27060-75-9大蒜素Toll樣受體3(TLR3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2-溴-5-甲氧苯(BMA) 27060-75-9豆腐果苷骨形成蛋白1(BMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Newcastle       disease virus

人血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit，48T/96T 用途: 固氮

小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Escherichia  coli

大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA Kit，48T/96T  拉丁屬名: Penicillium brevicompactum

大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA Kit，48T/96T用途: 分類、研究，具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。
大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒細(xì)胞SPHK2激酶活性熒光定量　FERMT1 (Fermitin family homolog 1) 　100 ul

組織SPHK2激酶活性熒光定量　FLAD1 (FAD synthase) 　20 ul

細(xì)胞SPHK激酶總活性熒光定量　ESPL1 (Separin) 　100 ul

組織SPHK激酶總活性熒光定量　FTO(Alpha-ketoglutaRate-dependent dioxygenase FTO) 　100 ul

細(xì)胞Akt1/PKBa激酶活性定量（A/B/C）　FASTK (Fas-activated serine/threonine kinase) 　20 ul

組織Akt1/PKBa激酶活性定量（A/B/C）　EPS15 (Epidermal growth factor receptor substrate 15) 　100 ul

細(xì)胞Akt2/PKBβ激酶活性定量（A/B/C）　EPHB4 (Ephrin type-B receptor 4) 　100 ul

組織Akt2/PKBβ激酶活性定量（A/B/C）　TUFM (Elongation factor Tu, mitochondrial) 　100 ul

細(xì)胞Akt3/PKBγ激酶活性定量（A/B/C）　EEF2 (Elongation factor 2) 　100 ul

組織Akt3/PKBγ激酶活性定量（A/B/C）　EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) 　500 ul

細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量（A/B/C）　ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) 　100 ul

組織Akt/PKB激酶總活性定量（A/B/C）　ERN2 (Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE2) 　100µl

細(xì)胞AURORA-A激酶活性定量（A/B/C）　EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) 　100 ul

組織AURORA-A激酶活性定量（A/B/C）　EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) 　100 ul

細(xì)胞AURORA-B激酶活性定量（A/B/C）　ERAS (GTPase ERas) 　100 ul

組織AURORA-B激酶活性定量（A/B/C）　ECHDC1 (Ethylmalonyl-CoA decarboxylase) 　100 ul
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。