1.ELISA試劑盒將抗原抗體反應固相化：即試驗中的包被環節，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。Elisa試劑盒此物理性吸附不損壞蛋白分子結構，Elisa試劑盒堅持其生物學特性和免疫學活性；
2.封閉：固相吸附蛋白對錯特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才干，為了確保抗原抗體反應的特異性，因而，包被剩余的固相表面應該用抗原抗體反應無關蛋白封閉。通常以為牛血清白蛋白是zui為抱負的封閉劑，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。
3.抗原抗體反應：ELISA試劑盒抗原或抗體在恰當的介質下可進行特異的抗原抗體反應。
4.酶反應：酶可以通過共價鍵與抗原或抗體銜接構成聯絡物，當抗原抗體反應的時分，被查看靶政策中也聯絡了酶分子。
5.底物反應：聯絡在抗原抗體中的酶分子，Elisa試劑盒可以促進底物發作顏色反應，查看人員可以裸眼查詢，可以通過顏色來斷定是不是有免疫反應的存在，通過顏色的深淺判別標本中相應抗原或抗體的含量，也可借用酶標儀在恰當的波長讀取吸光度值。
ELISA試劑盒的基本原理便是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應，并通過酶催化底物發作化學改變將抗原抗體反應通過顏色的方式顯現出來。
