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腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)方法

時(shí)間:2017/5/25閱讀:412
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腫瘤細(xì)胞是血液、淋巴和所有哺乳動(dòng)物組織類型中所見(jiàn)的吞噬細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞是造血系統(tǒng)中可塑性zui強(qiáng)的一種細(xì)胞,所有組織中都有這種細(xì)胞,并且其也具有*的功能多樣性。它們?cè)谡0l(fā)育、體內(nèi)平衡、組織修復(fù)和對(duì)病原體的免疫反應(yīng)中起很多不同作用。它們的多樣性意味著,幾乎每一種人類疾病都涉及它們,它們也是主要治療目標(biāo),因?yàn)樗鼈兊墓δ芸梢员患訌?qiáng)或抑制,以改變疾病的結(jié)果。
這個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)快,條件好時(shí)24h內(nèi)能分裂兩次至少。而且喜歡扎堆,所以2天就要傳代,不是真的空間不夠,而是細(xì)胞都擠在一起。所以,如果瓶子里細(xì)胞密度小,培養(yǎng)基2天還是很好,可是細(xì)胞卻扎堆,需要傳了,這樣培養(yǎng)基就浪費(fèi)了,我覺(jué)得應(yīng)該保持瓶中的細(xì)胞密度在20~40%左右,分裂2~3次就傳代,這時(shí)剛好培養(yǎng)基發(fā)黃。細(xì)胞太少就浪費(fèi)培養(yǎng)基了。
這個(gè)細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞,就是M0,未分化的腫瘤細(xì)胞,外觀是圓形高折光,貼壁非常快,10min內(nèi)能貼80%,也容易脫落,無(wú)*拍打200下或者*室溫30s輕輕拍打都能下來(lái)60~80%,不過(guò)無(wú)*吹打是吹不下來(lái)的。
如果培養(yǎng)條件不好,它會(huì)分化,變成多邊形,從高折光的小圓亮點(diǎn)變成灰色的一小片,變得粘附非常緊,所以我覺(jué)得應(yīng)該控制消化時(shí)間和拍打力度,不要過(guò)分追求把所有細(xì)胞都弄下來(lái),這樣一來(lái)影響狀態(tài)好的未分化圓形細(xì)胞活力,另一方面會(huì)把狀態(tài)不好的分化細(xì)胞弄下來(lái),不如縮短*時(shí)間到1min內(nèi),把分化過(guò)的高粘附細(xì)胞留在瓶里,正好起到對(duì)細(xì)胞分化狀態(tài)的選擇作用。
傳代時(shí)首先無(wú)*拍打,能弄下來(lái)約50%的細(xì)胞,然后加*拍打30s,鏡下觀察,一般30s剛剛好,剩下未脫落的都是分化的形態(tài)不好的細(xì)胞,這種腫瘤細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),如果要回到圓形,可以用*消化后傳代。

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