ATCC細(xì)胞的原代培養(yǎng)與正常細(xì)胞的原代培養(yǎng)的條件基本相似。一般常用腫瘤原代細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基、5～10%血清濃度、細(xì)胞培養(yǎng)添加劑、抗生素等等即可。或在原代培養(yǎng)時(shí)需加入原代細(xì)胞培養(yǎng)的特制添加物，或原患者血清（1~2%）以利細(xì)胞生長(zhǎng)。用細(xì)胞生長(zhǎng)因子如胰島素、雌激素等等。也可以考慮動(dòng)物媒介培養(yǎng)。

根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子。腫瘤組織分離為腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)的方法主要有組織塊法、酶消化法、鉭網(wǎng)法、脫落細(xì)胞法等。

1、組織塊法

將取得的瘤組織去除脂肪、結(jié)締組織及壞死部分，在平皿中用Hanks液洗3次，剪碎組織，切成1~2mm3小塊，接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，370C、5%CO2或加蓋并塞在普通恒溫箱中培養(yǎng)。

2、酶消化法

在剪碎組織，切成1~2mm3小塊中，加入0.25%*或2000U/ml膠原酶，在370C水浴中消化30min或更長(zhǎng)一些，去除消化液，用洗液洗3次，培養(yǎng)基洗1次后，用*培養(yǎng)基懸浮，并用吸管吹打分散制成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)。以（5~10）x108個(gè)/L細(xì)胞濃度，在專業(yè)性原代腫瘤細(xì)胞*培養(yǎng)體系中，370C、5% CO2下分瓶（或皿）中培養(yǎng)。

3、鉭網(wǎng)法

在一張面積約為1cm2的鉭網(wǎng)上放入上述剪碎的一塊或幾塊腫瘤組織塊（1~2mm3大小），用鑷子輕壓，使其粘于網(wǎng)上，再把鉭網(wǎng)放入培養(yǎng)皿中，使網(wǎng)下的組織塊與皿壁緊緊接觸， 在專業(yè)性原代腫瘤細(xì)胞*培養(yǎng)體系中，于370C、5% CO2下培養(yǎng)，每隔2~3天換液一次，5天后可見細(xì)胞從網(wǎng)上移出，并能在相當(dāng)于腫瘤*位形成純凈的單層腫瘤細(xì)胞。

4、脫落細(xì)胞法

將新鮮的腫瘤組織去除脂肪和結(jié)締組織后，洗液洗2次，用刀片將腫瘤組織切成細(xì)薄片，在切割的同時(shí)有許多腫瘤細(xì)胞脫落下來，脫落細(xì)胞經(jīng)洗滌后，加入*培養(yǎng)基，便可獲得較純的上層細(xì)胞在專業(yè)性原代腫瘤細(xì)胞*培養(yǎng)體系中，于培養(yǎng)瓶（或皿）中，370C、5% CO2下培養(yǎng)，每隔2-3天換液一次，7-10天腫瘤細(xì)胞逐漸長(zhǎng)成單層。

zui后，小編提示您一定要記住：

1、ATCC細(xì)胞全程操作和周圍環(huán)節(jié)一定要嚴(yán)格無菌，污染可能伴隨原代細(xì)胞分離、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇、運(yùn)輸?shù)鹊哪骋画h(huán)節(jié)或整個(gè)環(huán)節(jié)中，污染一定是原代細(xì)胞培養(yǎng)失敗的*問題。

2、一定要用專業(yè)性、配套的原代細(xì)胞*培養(yǎng)體系。在原代細(xì)胞分離和*代原代細(xì)胞培養(yǎng)用的原代細(xì)胞培養(yǎng)體系是該品種原代細(xì)胞培養(yǎng)的原代細(xì)胞培養(yǎng)體系。
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
包裝：    Many types of cells        輸尿管上皮細(xì)胞    5 × 105次方（1ml）
ATCC細(xì)胞