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上海莼試生物技術有限公司
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其它elisa免疫檢測試劑盒的其操作程序

時間:2018/3/20閱讀:174
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其它elisa免疫檢測試劑盒前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。酶聯免疫吸附試驗:是酶免疫測定技術中應用Z廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體( 聚苯乙烯微量反應板 )表面,使酶標記的抗原-抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。
1、阻斷ELISA試劑盒
   本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測方法。
下面以AP2型抗體的阻斷ELISA試劑盒檢測法為例介紹:
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 用200μl阻斷緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。
2、競爭ELISA試劑盒:此法主要用于測定小分子抗原及半抗原,其原理類似于放射免疫測定。
其基本程序為:
① 抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標抗原(對照孔僅加酶標抗原)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
④ 用ELISA試劑盒檢測儀測定OD值。
   被結合的酶標抗原的量由酶催化底物反應產生有色產物的量來確定,如果待檢溶液中抗原越多,被結合的標記抗原的量就越少,有色產物就減少,這樣根據有色產物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優點在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測;其主要不足在于每種抗原都要進行酶標記,而且因為抗原的結構不同,還需應用不同的結合方法。此外試驗中應用酶標抗原的量較多。
  本試驗同時設標準陰、其它elisa免疫檢測試劑盒陽性血清對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。
對照品    隱丹參酮    20mg    對照品
對照品    原阿片堿    20mg    對照品
對照品    脫水*內酯    20mg    對照品
對照品    丹參素鈉    20mg    對照品
對照品    *    20mg    對照品
對照品    五味子醇甲    20mg    對照品
對照品    蟲草素    20mg    對照品
對照品    湖貝甲素    20mg    對照品
對照品    異鼠李素    20mg    對照品
其它elisa免疫檢測試劑盒

 

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