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上海莼試生物技術有限公司
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原代細胞轉染方法的新突破

時間:2018/6/12閱讀:227
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原代細胞轉染時,電穿孔是一種常用的方法。它利用電脈沖瞬時電擊細胞的質膜,提高其通透性,從而促進分子(如核酸或蛋白)的進入。然而,這種方法會造成細胞存活率低,且細胞之間的轉染效果不一致。為了解決這些問題,西北大學的研究人員開發出一種新工具,用于單細胞的轉染。
這種新方法被稱為納米鋼筆探針電穿孔(nanofountain probe electroporation,NFP-E),讓研究人員可通過細胞表面的臨時納米孔將分子導入特定細胞內,這些納米孔是通過對細胞的一小部分施加局部電場而形成的。研究人員可調整電脈沖的持續時間,從而控制劑量,這是的。
文章的通訊作者,西北大學機械工程系的Horacio Espinosa教授表示:“這實在是令人興奮。將分子導入單細胞的能力正是生物技術研究人員所需的,可推進治療、診斷及藥物輸送的發展,有望實現個性化醫療的承諾。”
NFP-E是基于Espinosa實驗室開發的納米鋼筆探針(NFP)技術。NFP-E芯片是一種微加工的懸臂探針芯片,其中整合了微流體通道。在單細胞轉染應用中,他們將探針與電極和流體控制系統相結合,通過顯微操縱器或原子力顯微鏡實現定位控制。這一集成的系統實現了整個轉染過程,并通過光學顯微鏡對轉染后的細胞反應進行監測。
經研究證實,這一技術相當可靠,而且是多功能的。研究人員已使用NFP-E芯片將多糖、蛋白、DNA發夾結構和質粒DNA成功轉染到HeLa細胞。它不僅具有原代細胞選擇性,轉染效率也很高(達95%),且細胞存活率也非常高(達92%)。

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