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紅細胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA試劑盒?操作步驟

時間:2021/11/18閱讀:322
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紅細胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

小鼠髓過氧化物酶(mouse MPO)

小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC)

小鼠肌肉生成抑制素(mouse Myostatin)

小鼠巨噬細胞游走抑制因子(mouse MIF)

小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-1(mouse MIP-1)

小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-2(mouse MIP-2)

小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-3a(mouse MIP-3a)

小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-3β(mouse MIP-3β)

小鼠巨嗜細胞炎性蛋白-1a(mouse MIP-1a/CCL3)

小鼠基質金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1)

小鼠基質金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)

小鼠基質金屬蛋白酶-3(mouse MMP-3)

小鼠基質金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)

小鼠核轉錄因子(mouse NF-kB )

小鼠核轉錄因子p65(mouse NF-kBp65)

小鼠硝基酪氨酸(mouse Nitrotyrosine)

小鼠神經肽Y(mouse NPY)

小鼠神經生長因子(mouse NGF)

小鼠神經營養素3(mouse NT-3)

小鼠神經營養素4(mouse NT-4)

小鼠一氧化氮(mouse NO)

小鼠骨保護素(mouse OPG)

小鼠骨橋素(mouse OPN)

小鼠骨鈣素(mouse Osteocalcin)

小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG)

小鼠食欲素A(mouse Orexin A)

小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)

小鼠抑瘤素mouse Oncostatin M(mouse OSM)

小鼠催產素(mouse Oxytocin)

小鼠骨保護素配體(mouse OPGL)

小鼠血小板活化因子(mouse PAF)

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(mouse PAP)

小鼠血小板相關抗體IgG(mouse PAIgG)

小鼠增殖細胞核抗原(mouse PCNA)

小鼠纖溶酶原激活劑抑制物-1(mouse PAI-1)

小鼠血小板生長因子(mouse PDGF)

小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB)

小鼠血小板生長因子受體α(mouse PDGF sRα)

小鼠可溶程序性死亡因子(mouse sPD-1)

小鼠6-酮-前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)

小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)

小鼠磷脂酶A2(mouse sPLA2)

小鼠Pleiotrophin(mouse Pleiotrophin)

小鼠P53蛋白(mouse P53)

小鼠趨化因子(mouse RANTES)

小鼠抵抗素(mouse Resistin)

小鼠可溶性破骨細胞異化因子(mouse sRANKL)

小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)

小鼠S-100蛋白(mouse S-100)

小鼠性激素結合球蛋白(mouse SHBG)

小鼠超氧化物歧化酶(mouse SOD)

小鼠生長抑素(mouse Somatostatin)


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