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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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ATCC細(xì)胞
檢測試劑盒
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標(biāo)準(zhǔn)品

人G蛋白偶聯(lián)受體操作步驟

時(shí)間:2021/12/8閱讀:635
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人G蛋白偶聯(lián)受體操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒

小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)ELISA試劑盒

小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒

小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒

小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒

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小鼠高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒

小鼠高半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒

小鼠干燥綜合征抗原B(SSB)ELISA試劑盒

小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒

小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒

小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)ELISA試劑盒

小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒

小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒

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小鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒

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小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒

小鼠甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒

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小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒



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