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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>細(xì)胞培養(yǎng)初代消化培養(yǎng)法
1.細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青*的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的*液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩O瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8.細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) D-木糖 20mg/支 英文名稱 111508-200404 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 三十烷醇 20mg/支 英文名稱 111509-200302 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 愈創(chuàng)木酚 20mg/支 英文名稱 111510-200202 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 濱蒿內(nèi)酯 20mg/支 英文名稱 111511-200001 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 異龍腦 20mg/支 英文名稱 111512-200201 規(guī)格:
鑒別 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 漢黃芩素 20mg/支 英文名稱 111514-200403 規(guī)格:
鑒別 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 甜菊苷 20mg/支 英文名稱 111515-200001 規(guī)格:
細(xì)胞培養(yǎng)
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