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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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提高蛋白酶抑制劑的轉(zhuǎn)染效率的原因

時(shí)間:2018-5-14閱讀:303
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為了提高蛋白酶抑制劑的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如engreen的Entranster試劑,納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到低,如Entranster-E。

懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,是因?yàn)檫x對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。

懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。

目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。

其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。
蛋白酶抑制劑不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子IgG 人唾液酸(SA) 

 聚集蛋白IgG 人脫氧尿三磷酸(DUTP) 

 聚*/抗His tag(C端)標(biāo)簽IgG 人脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)

 聚*/抗His tag標(biāo)簽IgG 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)

 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”IgG 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)

 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”IgG 人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)

 抗6-磷酸*脫氫酶IgG 人透明質(zhì)酸(HA)

 抗Ⅱ型膠原IgG 人脫氫表雄酮(DHEA)
蛋白酶抑制劑

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