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大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒操作程序和洗板方法

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大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒操作程序:APOB試劑盒;大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒使用前請先將試劑盒在室溫下平衡半小時。
空白孔不加樣,只加顯色劑A,B和終止液用于調零。
標準品孔:每孔加入稀釋好的標準品50μl,零孔加入標準品/樣品稀釋液50μl,然后加入*抗原工作液50μl(零孔必須要做,并將其作為標曲的后一個點)。
樣品孔:加入樣品50μl(*直接加樣,濃度高可以用樣品稀釋液稀釋2-5倍),然后加入*抗原工作液50μl。
輕輕搖晃,蓋上封板膜,37℃培養箱中孵育30min。
將25倍濃縮洗滌液用蒸餾水25倍稀釋后備用。

g.       次洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

加入50μl親和素-HRP到標準品孔和樣品孔中,輕輕搖晃,蓋上封板膜,37℃培養箱中孵育30min。

i.        第二次洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

j.        顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。

k.       終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色).

l.        測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后10分鐘以內進行。

m.     計算:APOB試劑盒;大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒根據濃度和OD值算出標準曲線的回歸方程,建議用計算軟件進行計算,*使用ELISAcalc進行計算,擬合模型選用logistic曲線(四參數)。

大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒洗板方法

a.手工洗板:先洗去酶標孔中的的液體,在吸水紙上拍干,然后每孔加入300μl稀釋好的洗滌液,輕輕搖晃30秒,然后甩掉,在吸水紙上拍干,重復4-5次。

b.洗板機洗板:洗板機洗板比較便捷,但應操作熟練后使用。

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