滬鼎告訴您如何降低ELISA實驗背景問題

來源：上海滬鼎生物科技有限公司 2017年09月08日 10:00

ELISA實驗的原理似乎很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封閉。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果做得不太好，也有可能毀了整個實驗。在實驗結(jié)束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。

背景噪音會影響您對結(jié)果的判斷，滬鼎告訴您如何降低ELISA實驗背景問題。

1.洗滌
這一步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

2.優(yōu)化抗體濃度
如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會增加背景，為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。

3.封閉到底有多關(guān)鍵
封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會。如果背景過高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當(dāng)延長封閉時間。

如果您一直被背景問題所困擾，那么也許您該花些時間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時間，但也是值得的。

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