動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不理想，不知道是哪里出了問(wèn)題。幫我看下是什么原因，我自己合成8個(gè)氨基酸的抗原短肽，和BSA耦連后免疫動(dòng)物，1個(gè)月后用ELISA測(cè)定血清中針對(duì)抗原短肽的抗體滴度，具體步驟：用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板，4度冰箱18小時(shí)，再用1%OVA37度封閉2小時(shí)，洗板3次。待測(cè)血清用10%小牛血清倍比稀釋，37度溫育1小時(shí)，洗板3次，加入二抗，37度溫育40分鐘，洗板3次，加TMB顯色，結(jié)果比較詭異，陰性對(duì)照也顯色了，且OD值和陽(yáng)性差別不大。是什么原因呢？是洗板的問(wèn)題嗎？
   將問(wèn)題轉(zhuǎn)至技術(shù)部，專業(yè)技術(shù)員回應(yīng)，ELISA結(jié)果不理想原因可以根據(jù)這幾個(gè)方面分析：
    1.洗板是否串孔，如串孔的話可能造成污染；您一抗、二抗每次洗板時(shí)洗5遍以上。
    2.封閉液的問(wèn)題，你說(shuō)陰性對(duì)照也顯色了，那zui主要的問(wèn)題應(yīng)該是封閉，應(yīng)重新考慮用OVA封閉是否適合，如果OVA封閉效果不好的話可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關(guān)的帖，你搜一下看看。
    3.建議動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒包被在37度兩小時(shí)，這樣的效果可能會(huì)好一些。
含量測(cè)定（HPLC）    琥珀酸*    對(duì)照品    100827-200501        100mg
HPLC法含量測(cè)定    *    對(duì)照品    100828-200501        100mg
HPLC法含量測(cè)定    萘磺酸*    對(duì)照品    100829-200501        100mg
含量測(cè)定（HPLC）    *    對(duì)照品    100840-200501        100mg
溶出度檢查    *    對(duì)照品    100841-200501        100mg
含量測(cè)定（HPLC）    鹽酸*    對(duì)照品    100842-200501        100mg
HPLC法含量測(cè)定    鹽酸氟*    對(duì)照品    100844-200501        100mg
HPLC法含量測(cè)定    *    對(duì)照品    100845-200501        100mg
含量測(cè)定    異喹啉物    對(duì)照品    100846-200501        100mg
含量測(cè)定（內(nèi)標(biāo)）    對(duì)羥基苯甲酸乙酯    對(duì)照品    100847-200501        100mg
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒