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紫外分光光度計的工作原理是什么?

來源:山東藍景電子科技有限公司   2025年05月07日 14:50  
  紫外分光光度計的工作原理主要基于朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law)。
 
  當一束紫外或可見光通過含有吸光物質的均勻溶液時,部分光會被溶液中的吸光物質所吸收,導致光強度減弱。
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  吸光物質對光的吸收程度與溶液中吸光物質的濃度、光通過溶液的路徑長度(通常稱為光程)以及吸光物質對特定波長光的吸收系數有關。
 
  具體來說,入射光強度(I?)與透過光強度(I)之間的關系可以用朗伯-比爾定律表示為:A = -log (I / I?) = ε × c × l ,其中 A 為吸光度,ε 為摩爾吸光系數(與物質的性質及入射光波長有關),c 為溶液中吸光物質的濃度,l 為光程。
 
  在紫外分光光度計中,光源發出連續的紫外-可見光,經過單色器分光,得到特定波長的單色光,然后照射到裝有樣品溶液的比色皿中。檢測器測量透過樣品溶液后的光強度,并與入射光強度進行比較,從而計算出吸光度。
 
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  通過改變入射光的波長,并測量不同波長下的吸光度,就可以得到物質的吸收光譜。根據吸收光譜的特征峰位置和強度,可以對物質進行定性和定量分析。
 
  例如,在測定蛋白質濃度時,由于蛋白質中的芳香族氨基酸在 280nm 波長處有特定的吸收,通過測量該波長下的吸光度,結合已知的摩爾吸光系數和光程,就可以計算出蛋白質的濃度。
 

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