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豬皮質酮/腎上腺酮elisa檢測試劑盒說明

時間:2019/7/25閱讀:487
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                           豬皮質酮/腎上腺酮elisa檢測試劑盒說明

    我有那無比絢爛的青春,于是我有了生機盎然的世界。青春如一片豐收恬淡的莊園,碩大的希望與幸福等待著我的一閃而過而采擷滿懷。青春中沒有等待的果實,只有昂揚的斗志去收獲,青春里的我們雖沒有指點江山的豪邁壯舉但也不乏為了薄發而厚積的深沉。接下來介紹豬皮質酮/腎上腺酮elisa檢測試劑盒說明。

采集及保存:

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3. 其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

4. 樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋5,000倍。

ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。

1.樣品稀釋 酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性。因此,國外檢測血清抗體的試劑盒,均規定將血清稀釋至適當的倍數,以降低非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴格按使用說明書操作,如某些產品應取10μl樣品進行稀釋,個別用戶取5μl甚至1μl樣品進行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數不準確,檢測結果出現問題。

2.試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。 

3.樣品和試劑的混勻 稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。

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