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檢測elisa試劑盒實驗原理與步驟?

時間:2020/8/12閱讀:334
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檢測elisa試劑盒試驗原理:

檢測elisa試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知ALT濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微

孔酶標板內進行檢測。先將ALT和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經

過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的

深淺和樣品中ALT的濃度呈比例關系。

檢測elisa試劑盒操作注意事項:

試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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