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賴氨酸(Lys)含量測定試劑盒Lys含量計算

時間:2023/9/11閱讀:753
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測定原理:

蛋白質(zhì)中的賴氨酸(lysine,Lys)具有一個游離的ε-NH2,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍紫色物質(zhì),其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴氨酸的含量成線性關(guān)系。亮an酸與賴氨酸的碳原子數(shù)目相同,而且僅有—個游離氨基(ε-NH2),所以通常用亮an酸配制標準液。

賴氨酸含量計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下:

標準條件下測定回歸方程為y = 0.0062x - 0.0212x為賴氨酸含量(µg/mL),y為吸光值。

1.按照蛋白濃度計算

賴氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515

=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr

2.按照樣本質(zhì)量計算

賴氨酸含量(µg/g干重)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515

=185.73×(△A+0.0212) ÷W

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mLV2:加入提取液體積,1 mLCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g1.1515,校正系數(shù)。

b.96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定回歸方程為y = 0.0031x - 0.0212x為賴氨酸含量(µg/mL),y為吸光值。

1.按照蛋白濃度計算

賴氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515

=371.45×(△A+0.0212) ÷Cpr

2.按照樣本質(zhì)量計算

賴氨酸含量(µg/g干重)= [(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515

=371.45×(△A+0.0212) ÷W

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mLV2:加入提取液體積,1 mLCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g1.1515,校正系數(shù)。

 




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