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引物各種純化方式簡介2022/12/19
引物純化方式有哪些，如何選擇？1、C18柱脫鹽：有人稱其為簡易反相柱，它對DNA有特異性的吸附，可以被有機溶解洗脫，但不會被水洗脫，所以能有效地去除鹽分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。實際上，它...
選擇合適二抗需考慮方面2022/12/12
二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體，上通常連有酶或熒光素等標簽。由于二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以廣泛應用，如WB/ELISA/IHC/IP等。二抗針對某一特定物種的所有...
抗體保存溫度和條件2022/11/23
抗體的保存方法一般會直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當的情況下，大部分抗體可以存放數月甚至數年，一般情況需嚴格按照抗體說明書來進行保存。抗體保存溫度和條件：①抗體收到后，需在12000rpm離心...
抗體生產制備工藝2022/11/14
抗體是哺乳動物適應性免疫系統對抗病原體的核心，它是在病原體刺激下由漿細胞（效應B細胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識別并結合特異的病原體抗原，隨后通過介導中和作用、調理作用、效應T細胞殺傷等來清除病原...
選擇正確的二抗方式2022/11/7
二抗的設計原理:根據同一種來源的同種亞型抗體的Fc段是保守的，根據這一原理設計出二抗，二抗與一抗的來源Fc段亞型相關。選擇正確的二抗方式如下：1.針對一抗的宿主來源選擇：二抗指向一抗的物種。2.針對一...
分析影響ELISA試劑盒變質的原因與對策2022/10/31
ELISA試劑盒變質是ELISA實驗中比較常見的問題，現在分析影響ELISA試劑盒變質的原因與對策。1、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量wan全一致，即使是通過批批檢的項目其檢...
PCR反應出現非特異性擴增問題原因及對策2022/10/24
出現非特異性擴增：PCR擴增后出現的條帶與預計的大小不一致，或大或小，或者同時出現特異性擴增帶與非特異性擴增帶。1、引物與靶序列不*互補或引物聚合形成二聚體。2、Mg2+離子濃度過高。3、退火溫度過低...
PCR檢測注意事項2022/10/17
PCR反應擴增出了高的拷貝數，下一步檢測就成了關鍵。熒光素（溴化乙錠，EB）染色凝膠電泳是極常用的檢測手段。電泳法檢測特異性是不太高的，因此引物兩聚體等非特異性的雜交體很容易引起誤判。但因為其簡捷易行...
重組蛋白的特性2022/10/10
重組蛋白分為凍干粉和溶液態兩種保存形式，原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態，真核細胞表達的重組蛋白為溶液態保存，這樣使得重組蛋白非常穩定，在-80℃條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解，其中溶解...
羊抗人白蛋白抗體特性和功能2022/10/5
羊抗人白蛋白抗體特性和功能：一、IgGIgG于出生后3個月開始合成，3～5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量最高的抗體，占血清總Ig的75%～80%。人lgG有4個亞類，根據其在血清中濃度的高低...
感受態細胞制備原理及操作2022/9/26
目前,感受態細胞的制備常用冰預冷的CaCl2處理細菌的方法制備,即用低滲CaCl2溶液在低溫(0℃)時處理快速生長的細菌,從而獲得感受態細菌。此時細菌膨脹成球形,外源DNA分子在此條件下易形成抗DNA...
細胞培養的優點2022/9/19
細胞培養的優點：1.研究的對象是活細胞在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。2.研究條件可以人為控制pH、溫...
細菌的培養方法2022/9/13
根據不同的標本及不同的培養目的，可選用不同的培養方法。通常把細菌的培養方法分為需氧培養、二氧化碳培養、微需氧培養和厭氧培養四種。1．需氧培養是指需氧菌或兼性厭氧菌在有氧條件下的培養，將已接種好的平板、...
常用免疫組織化學方法的原理2022/9/5
幾種常用免疫組織化學方法的原理：1、免疫熒光方法是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原...
ELISA試劑盒檢測血清注意要點2022/8/30
ELISA試劑盒檢測血清使用說明大部分elisa檢測均以血清為標本。血清標本可按慣例方法收集，應留意防止溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本可...
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