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上海莼試生物技術有限公司
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elisa檢測試劑盒實驗縮小誤差概率的注意事項

時間:2018/11/6閱讀:280
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      有客戶說elisa檢測試劑盒實驗復雜,還常常會出現(xiàn)誤差,而誤差概率的縮小就在于您。除了多點細心之外,還有一些需要重點注意的地方。

縮小誤差概率,這些您得重點注意:
 1. 檢驗技師
    應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
 2. 使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
 3. 仔細閱讀說明書
    嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進。
 4. 洗滌*
    洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。
 5. 嚴控反應時間
    反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
 6. 注意elisa試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。
 7. 評估試劑的實用性
    試劑的穩(wěn)定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
 8. 嚴格掌握顯色時間
    顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
 9. 加樣要準確、快速
    如果加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,所以加樣應慎重。要求在一定時間內加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。

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