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ELISA試劑盒實驗應(yīng)留意以下原理

時間:2018/11/15閱讀:216
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     ELISA試劑盒檢測系統(tǒng)可以說是現(xiàn)在使用多的檢測方法,而且技術(shù)手段很多,對于花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低,這些都起到了至關(guān)重要的作用,一定要多注意,那么elisa檢測系統(tǒng)穩(wěn)定,這些實驗過程都要注意。

     應(yīng)留意以下原理:因為蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。

    還有有的包被原可能不是蛋白,對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被,親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,這種包被方法平均、牢固,已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。

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