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上海莼試生物技術有限公司
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微生物膠原酶ELISA試劑盒實驗操作步驟

時間:2020/3/11閱讀:291
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微生物膠原酶I(collagenase I)ELISA試劑盒操作步驟:

①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

②.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

④.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次   (也可用洗板機洗板)。

⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

⑦.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷

繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

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