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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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ATCC細(xì)胞
檢測(cè)試劑盒
elisa檢測(cè)試劑盒
分子生物學(xué)
培養(yǎng)基
生化試劑
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質(zhì)粒
PCR試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)
生化檢測(cè)試劑盒
PCR檢測(cè)試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品

微生物膠原酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟

時(shí)間:2020/3/11閱讀:292
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微生物膠原酶I(collagenase I)ELISA試劑盒操作步驟:

①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

②.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

③.樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

④.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次   (也可用洗板機(jī)洗板)。

⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

⑦.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

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